油莎豆蛋白水解物复合壳聚糖盐酸盐在豆乳中的应用

申报人:孙彬言 申报日期:2024-07-01

基本情况

2024
油莎豆蛋白水解物复合壳聚糖盐酸盐在豆乳中的应用 盲选
创新训练项目
工学
食品科学与工程类
学生来源于教师科研项目选题
一年期
油莎豆是富含营养的健康食品,其榨油后豆粕的蛋白含量低且功能性质不佳。本实验通过酶水解法改性油莎豆蛋白,提升其溶解度,并利用mTGase反应制备其与壳聚糖盐酸盐的共价复合物。实验旨在探究复合物形成的最佳条件,并研究其作为乳化剂在油莎豆乳中的应用效果。此研究旨在优化油莎豆的利用价值,为食品加工提供新途径。

主持省级大赛一项,参与省级大赛两项,发表学术论文两篇

主持或参与省部级课题4项,发表SCI检索论文7篇,出版专著2部,获奖1项,发明专利2项

指导团队开展研究,提供实验设备

省级

项目成员

序号 学生 所属学院 专业 年级 项目中的分工 成员类型
孙彬言 应用科技学院、继续教育学院 食品科学与工程(专升本) 2023 确保整个项目按时、按计划进行,协调各个团队成员的工作;激励团队成员,保持团队合作和积极性,处理团队内部的问题。
韩玟珈 生命科学技术学院 生物技术 2023 主要负责申报书填写,辅助文书
孙岩 食品学院、北大荒农产品加工现代产业学院 食品质量与安全 2023 主要负责答辩,辅助PPT制作。
林宜彬 农学院 农学 2023 主要负责查资料,调研,背景类等

指导教师

序号 教师姓名 所属学院 是否企业导师 教师类型
李丹 食品学院、北大荒农产品加工现代产业学院

立项依据

 油莎豆,是油莎草(Cyperus esculentus L.)的地下块茎[1],富含脂质、蛋白质、淀粉、膳食纤维和多种生物活性因子的优质健康食品。在我国,油莎豆榨油后的豆粕年产约四万吨,两万吨被用于生产具有油莎豆风味的酒,剩余部分用作畜牧业饲料或直接废弃。油莎豆中的蛋白含量为3.28%-8.45%[2],分为清蛋白、球蛋白、谷蛋白和醇溶蛋白,清蛋白占主要组成部分。通过碱溶酸沉提取的油莎豆蛋白溶解度、乳化活性数值、乳化持续性均低于大豆,因此天然的油莎豆蛋白功能性质无法满足食品加工需要,需要通过物理、化学、生物手段改善其部分性质,以满足不同生产要求。

蛋白和多糖复合物对食品乳液体系的稳定性有着积极的影响,使用蛋白与多糖复合来大幅提升蛋白溶解性对于乳液稳定性具有实际意义。蛋白/多糖复合物可通过在外源环境下的稳定性或者依靠多糖的表面活性来达到相应的目的[3],最为突出作用便是抑制蛋白在等电点范围的沉淀或絮集。此外,通过与多糖的结合,我们可以显著优化蛋白质颗粒在两相界面上的湿润特性,这一改进为蛋白质和多糖在皮克林乳液、乳液凝胶、微乳液等食品运输系统中广泛应用打开了新局面。另外蛋白/多糖复合物对食品体系的抗氧化性也有一定的增强效果[4]。根据现有研究,蛋白-多糖的结合体能够通过形成坚固或负载抗氧化剂的界面层,有效地抑制乳剂类食品中脂质的氧化过程。有助于保持油水界面稳定。

本实验通过木瓜蛋白酶水解法改性油莎豆蛋白从而提高其溶解度,使用mTGase反应制备油莎豆蛋白水解物与壳聚糖盐酸盐共价复合物,探查

1.木瓜蛋白酶对油莎豆进行单酶水解,测定木瓜蛋白酶水解物结构表征和功能性质
    设置底物浓度为4%,酶添加量5000 U /g,酶解时间4h,每种蛋白酶在最适pH、温度条件下酶解,每30min测定一次水解度,水解结束后置于100℃沸水中持续10min灭酶,水解液冷却后放入-20℃冰箱冷冻保藏,冷冻干燥后得到油莎豆蛋白水解物,放入-4℃冰箱贮藏备用。测定木瓜蛋白酶水解物结构表征和功能性质.
2.油莎豆蛋白及其水解物结构功能的测定
   使用未改性油莎豆蛋白作为对照,通过结构表征和功能性质比较水解前后油莎豆蛋白的变化情况。
3.复合物制备
    将1g壳聚糖盐酸盐溶于50 mL蒸馏水中,制备成 2%(w/v)的壳聚糖盐酸盐溶液。然后将2%壳聚糖盐酸盐溶液和油莎豆蛋白水解物混合,并用稀盐酸调节pH,形成均匀的溶液。然后向上述混合物中加入0.1g转谷氨酰胺酶粉末,50℃持续磁力搅拌50分钟。 然后将溶液在沸水中处理10分钟,冷却至室温。将溶液以3000 r/min 的速度离心10分钟。随后,取上清液,冷冻干燥后得到油莎豆蛋白水解物/壳聚糖盐酸盐共价复合物。
    为获得最佳的接枝性能,优化反应pH、反应时间以及蛋白水解物与壳聚糖盐酸盐的质量比。反应时间(10、20、30、40、50、60、70 分钟)、油莎豆蛋白水解物与壳聚糖盐酸盐的质量比(10/1、20/1、30/1、40/1、50/1)、反应pH(6.10、6.20、6.30、6.40、6.50)。它们的变量都固定在某一数值上,而在一次实验中只改变一个变量。
4.复合物在豆乳中的应用
    将复合物作为乳化剂与市场常用的大豆卵磷脂等乳化剂分别加入油莎豆乳中。对油莎豆乳的外观形态、香味、色泽、口感4个方面评价

油莎豆蛋白蕴含了完整的18种氨基酸组合,其中人体必需的氨基酸占据了高达46.03%的比例,这一数值显著超越了世界卫生组织(WHO)与联合国粮食及农业组织(FAO)联合推荐的36%的标准,我们以第一限制性氨基酸的评分为标准来考量蛋白质氨基端的质量时,可以得到,油莎豆蛋白的得分远高于大豆蛋白的51.4分,为78.9。对油莎豆蛋白的消化率也进行了评价,结果表明,油莎豆蛋白的体外消化率为76%[25]。综上所述,从氨基酸谱和生物利用度来看,油莎豆蛋白具有较高的品质和商业价值。但是使用碱溶酸沉提取的油莎豆蛋白溶解度约为41.29%,乳化活性指数为42%,乳化稳定性指数为12.6%[26],因而在生产加工中需要对其进行改性,满足实际生产需要。

创新点

通过物理、化学方法改善其部分性质,以满足不同生产要求。例如:高压均质,球磨和非热等离子体,超声,pH偏移。我们通过生物改性方法,使用价格低廉木瓜蛋白酶水解油莎豆蛋白,使成本进一步降低。同时,油莎豆蛋白水解物复合壳聚糖盐酸盐的制备,进一步促进了蛋白质和糖的结合,极大地提高了其乳化性能。

项目特色

本项目利用脱脂油莎豆豆粕提取的油莎豆蛋白为主要原材料,拓宽油莎豆的应用领域,延长油莎豆加工产业链,提高了油莎豆价值,解决豆乳乳化稳定性较弱的问题。

技术路线




拟解决的问题

油莎豆蛋白溶解度较差,因此选择酶法改性油莎豆蛋白。蛋白复合多糖作为乳化剂较多,但是蛋白水解物复合多糖研究较少,将通过已有的植物蛋白复合壳聚糖盐酸盐的制备条件及蛋白水解物复合多糖制备乳化剂条件摸索油莎豆蛋白水解物复合壳聚糖盐酸盐制备乳化剂的条件。

 

预期成果

发表中文文章一篇

2024.03—2024.04查找相关资料;

2024.04—2024.06实验方案的撰写及实验的准备工作;

2024.06—2024.09酶法改性油莎豆蛋白结构表征和功能性质的研究,油莎豆蛋白水解物的制备;

2024.09—2024.12 mTGase反应制备油莎豆蛋白水解物-壳聚糖盐酸盐共价复合物最适条件研究;

2024.12—2025.03油莎豆蛋白水解物-壳聚糖盐酸盐共价复合物在油莎豆乳中的应用研究;

2025.03—2025.05撰写论文并发表

2025.05—2025.06撰写研究报告,准备结题

1)油莎豆基本营养指标

2)油莎豆全粉焙烤食品

3)已提取出足够实验的油莎豆蛋白

1)具备条件完善的实验室,例如生物技术中心,国家杂粮工程技术中心.

2)团队成员来自四个学院,时间有一定冲突,前期工作分配不平衡。在相互了解后,时间工作分配合理,研究进展开始提升。

经费预算

开支科目 预算经费(元) 主要用途 阶段下达经费计划(元)
前半阶段 后半阶段
预算经费总额 5000.00 2600.00 2400.00
1. 业务费 2000.00 400.00 1600.00
(1)计算、分析、测试费 500.00 样品分析 400.00 100.00
(2)能源动力费 0.00 0.00 0.00
(3)会议、差旅费 0.00 0.00 0.00
(4)文献检索费 0.00 0.00 0.00
(5)论文出版费 1500.00 论文发表版面费 0.00 1500.00
2. 仪器设备购置费 0.00 0.00 0.00
3. 实验装置试制费 0.00 0.00 0.00
4. 材料费 3000.00 实验试剂购买 2200.00 800.00

项目附件

  • 全文(标明引文)报告单_油莎豆蛋白水解物复合壳聚糖盐酸盐在豆乳中的应用 (1).pdf
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结束